Vsebina
Čeprav jih ni mogoče videti s prostim očesom, so bakterije povsod. Obstajajo v hrani, tleh, vodi, površinah znotraj naših domov ter v in na naših telesih. Bakterije običajno obstajajo v mešani populaciji. Izolacija določene bakterije iz drugih bakterijskih vrst v danem vzorcu mikrobiologom omogoča, da preučijo njeno zgradbo in delovanje, značilnosti, uporabljene pri njeni identifikaciji. Mikrobiologi pogosto izolirajo bakterije z eno od več tehnik plošč.
Orodja
Za prenos mikroorganizmov se uporablja inokulirajoča zanka. Sestavljen je iz nikromatske ali platinaste žice z majhno, krožno zanko na enem koncu. Drugi konec je raven in drsi v ročaj. Na voljo so tudi plastične enkratne zanke za enkratno uporabo. Bakterije lahko izoliramo le, če rastejo. Mikrobiologi gojijo bakterije za izolacijo plošč v plitvi, okrogli petrijevi posodi, napolnjeni s trdnim medijem, imenovanim agar. Agar posnema okolje, v katerem bakterije naravno rastejo. Posode, napolnjene z mediji, so sterilne in pokrite, da preprečimo rast neželenih organizmov. Med izolacijo ploščatih plošč se inokulacijska zanka večkrat sterilizira v plamenu Bunsenovega gorilnika.
Načelo
Tehnika s črtasto ploščo je najbolj priljubljena metoda za izolacijo specifičnih bakterij iz vzorca, ki vsebuje mešanico mikroorganizmov. Tehnika v bistvu razredči število organizmov in zmanjšuje njihovo gostoto. Mikrobiologom omogoča razlikovanje in izoliranje posameznih bakterijskih kolonij. Kolonija je vidna kopica bakterij. Vse bakterije v eni koloniji izvirajo iz iste bakterijske celice. Posledično so posamezne kolonije „čiste“ kolonije. Čista kolonija se prenese na drugo ploščo, da nastane čista kultura, sestavljena iz ene vrste bakterij.
Postopek
Če se pravilno opravi, izolacija ploščic s ploščicami tanjša vzorec in posameznim bakterijskim celicam omogoči, da se razvijejo v izolirane kolonije. Mikrobiolog začne s sterilizacijo inokulacijske zanke v plamenu. Ohladi zanko tako, da se jo dotakne agarja, nato zanko namoči v vzorec in jo razširi naprej in nazaj, da pokrije del plošče. Sterilizira zanko, jo ohladi in inokulira drugi sosednji odsek plošče tako, da zanko skozi prvi odsek vleče večkrat in z cikcakastim gibom pokrije drugi odsek. To pobere majhno število bakterij iz prvega oddelka in jih prenese v drugi oddelek. Število ponovitev tega osnovnega postopka je odvisno od uporabljene metode plošče s črtami. Kljub metodi se originalni vzorec uporabi za inokulacijo samo prvega dela plošče.
Metoda trakovne plošče
Metode narisane plošče se razlikujejo glede na število narisanih odsekov agarja. Metoda T-proge uporablja tri odseke: zgornji del in dva enako velika spodnja dela. Začetni inokulum se postavi v zgornjo polovico plošče. Bakterije se vlečejo od zgornjega dela do enega od spodnjih delov, nato od tega spodnjega dela do drugega. Pri metodi kvadrantov so črte štiri enake velikosti odsekov. Metoda neprekinjenega striženja običajno vključuje inokulacijo zgornje polovice plošče, vrtenje za 180 stopinj in inokulacijo druge polovice plošče brez sterilizacije zanke ali vlečenja bakterij iz prejšnjega odseka.