Vsebina
Za določanje koncentracije nekaterih spojin, na primer beljakovin, v raztopini se uporablja spektrofotometer. Na splošno se skozi kiveto, napolnjeno z vzorcem, sveti luč. Izmeri se količina svetlobe, ki jo absorbira vzorec. Ker spojine absorbirajo svetlobo v različnih spektralnih območjih, je treba za analizo določiti pravo valovno dolžino. Obstaja veliko načinov za izračun koncentracije neznanih vzorcev s spektrofotometrijo, vendar uporaba referenčnih standardov daje najboljšo natančnost. Poleg tega standardi prav tako navajajo, ali spektrofotometer ne deluje pravilno ali imajo druge težave z analizo.
Izračun po enačbah z ravnimi črtami
Analizirajte referenčne standarde na začetku analize. Standardi so znane koncentracije in se uporabljajo za umerjanje opreme in preverjanje natančnosti. Vsi vzorci morajo biti v delovnem območju standardov. V nasprotnem primeru je treba vzorce razredčiti ali povečati koncentracijo standardov.
Naredite si razpredelnico ali linijski graf s standardnimi odčitki koncentracije in vpojnosti. Koncentracija bo na osi y, vpojnost na osi x. Standardi so na primer 1 ppm, 2,5 ppm in 5 ppm. Podana absorpcija je bila 1 ppm = .25, 2.5 ppm = .5 in 5 ppm = .75.
Formatirajte vrstico trenda, da se na grafu prikaže enačba. Enačba bo pokazala formulo y = mx + b. Na primer, s pomočjo standardov v koraku 2 je enačba y = .1224x + 0,1531. Večina trendnih linij je prestrezano na nič, vendar je to odvisno od analitične metode in vrednosti R-kvadrata.
Analizirajte neznane vzorce in zabeležite odčitke absorbcije.
Za določitev koncentracije vzorcev uporabite enačbo (y = mx + b).
Razumevanje enačbe ravne črte
Naj bo vrednost Y enaka koncentraciji. To se bo rešilo.
Naj bo "X" enak vpojnosti vzorca. To je absorpcija, merjena s spektrofotometrom.
Dovoli, da "" izenači naklon in "b" enak y-prestrezku. Obe sta podani, če pa je bila vrstica trenda prisiljena skozi 0, bo "b" 0.
Rešite za koncentracijo. Z uporabo primera v koraku 3 nadomestite "x" kot dano absorpcijsko vrednost .563. Zato:
y = .1224 (.563) + 0.1531
y (koncentracija) = .222011