Tako kot pri uporabi katerega koli znanstvenega instrumenta, se morate prepričati, da je instrument v dobrem stanju, preden ga uporabite za analizo vzorca. Preverjanje odziva instrumenta za znani vzorec preveri, ali je instrument pravilno umerjen. Spektrofotometri zahtevajo občasno kalibracijo za zagotovitev pravilnega odziva instrumenta. Infrardeči (IR) spektrofotometri uporabljajo polistiren kot kalibracijski standard. S pregledom instrumenta s koščkom polistirena v nosilcu vzorca se preveri prisotnost vrhov, opaženih na IR-spektrih, in relativna intenziteta konic.
Vklopite spektrofotometer in pustite, da se vsaj 10 minut segreje. Čas ogrevanja je potreben, da se vir stabilizira. Brez stabilnega vira se ne morete zanesti na pridobljene spektre. Analitični signal temelji na slabljenju izvornega sevanja s vzorcem.
Kalibracijski standard zaženite tako, da v držalo za vzorec položite kos polistirenske folije. Brez preizkusa z vzorcem znanih spektrov, imenovanim standard, nimate gotovosti, da spektrofotometer deluje pravilno.
Pridobite spektre za vzorec polistirena. Primerjajte spektre s spektrom iz standardne referenčne vrednosti IR spektrov. Preverite, ali obstajajo vsi pričakovani vrhovi na testnih spektrih. Lokacija vrhov se mora ujemati z valovno dolžino absorpcije.
Preverite spektre in se prepričajte, da je moč signala znotraj 95 odstotkov največje vrednosti za najmočnejši vrh. Če je najmočnejši vrh v spektrih večji ali manjši od polne skale, prilagodite slabljenje, da dobite pravilno jakost signala.
IR spektrofotometer pogosto umerjajte. Najmanjša pogostost umerjanja mora vključevati pregled tik pred in en dan po vašem delu.