Vsebina
Znanstveniki in raziskovalci preučujejo rast bakterij s pripravo kultur v laboratoriju. Petrijeve posode, ki vsebujejo hranilni agar, gojijo bakterijske kulture iz enega samega povoda ali inokulacije. Študenti lahko doma pripravijo hranilni agar s pomočjo zalog iz trgovin z živili ali z zdravo hrano za projekt znanstvenega sejma. Običajne kuhinjske naprave in osnovna kuhinjska posoda zagotavljajo orodje za pripravo sterilnega gojišča, ki ga je mogoče uporabiti v petrijevih posodah. Upoštevanje sterilnih tehnik s segrevanjem materialov in ohranjanjem čistih in suhih površin bo izboljšalo rezultate s preprečevanjem plesni in delcev, da bi onesnažili kulturo.
Kavni filter postavite v cedilo in cedilo obesite nad odprtino prozorne posode.
Počasi vlijte juho v filter, pri čemer pazite, da juha ne prelije s strani filtra. Če se filter zamaši z delci, odstranite uporabljeni filter, ga nadomestite s čistim filtrom in nadaljujte z vlivanjem juhe.
Odstranite cedilo in filtrirajte z vrha posode in opazujte, ali je juha videti bistra (tj. V tekočini ni suspendiranih delcev). Če delci plavajo v tekočini, ponovite koraka 1 in 2 z drugo prozorno posodo in filtrom za svežo kavo.
Lonec postavite na štedilnik in v lonec nalijte bistro juho.
V lonec z juho dodajte 16 unč destilirane vode.
Vklopite štedilnik in prilagodite toploto na srednje nizko. Juho segrejte na vrelišču (t.j. blizu strani lonca se pojavijo majhni mehurčki).
V jedilnico (približno 2,5 grama) dodamo 1 čajno žličko agar-agar praška in mešamo mešanico, dokler se prašek ne raztopi. Prašek premešajte, da se prašek raztopi in preprečite, da se želatina potopi na dno lonca (kjer lahko gori).
Ponovite korak 7, dokler se ves agar-agar prašek v vodi ne raztopi.
Juho mešajte približno 1 minuto, da se ves prah popolnoma raztopi.
Izklopite štedilnik, postavite pokrov na lonec in pustite, da se tekočina ohladi vsaj 15 minut.
Sterilne petrijeve posode razporedite po vrsti za enostavno sestavljanje, vendar ne odstranjujte pokrovov. Če želite, postavite trivaljnik, da drži topel lonec. Če namesto petrijev uporabljate pokrovčke s skodelicami za kremo, sterilizirajte skodelice, tako da skodelice in pokrove postavite obrnjene (na glavo) na folijo s piškoti, pokrito s folijo, in pecite najmanj dve uri pri 375 stopinjah Fahrenheita. Pred uporabo poskrbite, da se sterilizirane skodelice in pokrovi popolnoma ohladijo.
Previdno se dotaknite zunanje strani lonca, da preverite, ali je na dotik topel, in lonec postavite na trivet. Če je lonec prevroč na dotik, počakajte vsaj 10 minut, da se lonec ohladi.
Odstranite pokrov in odložite. Postavite lonec v lonec.
Odstranite pokrov iz ene petrijeve posode in izpustite hranilno juho, da posodo napolnite na polovico. Posodo takoj pokrijemo s pokrovom.
Ponovite korak 14 za vsako petrijevo posodo.
Pustite, da se hranilna juha strdi v petrijevih posodah vsaj eno uro, brez motenj.
Petrijeve posodice nežno stresemo ena ob drugo, da preverimo, ali se je hranilna juha popolnoma strdila. Če juha ni popolnoma gelirana, počakajte še 20 minut, preden ponovno preverite.
Pokrijte mizo ali ravno površino z zvitkom papirnatih brisač, da ustvarite sterilno delovno površino. Odtrgajte list papirnate brisače in ga štirikrat zložite, da ustvarite debelo pravokotno vato. To vato nastavite na en konec delovnega območja.
Prestavite eno petrijevo posodo na sterilno delovno površino in odstranite pokrov. Posodo previdno obrnite in en konec položite na stran zložene vate, tako da leži obrnjena in rahlo nagnjena (z rahlo režo po vati papirnate brisače).
Obrnite pokrov in ga postavite nad petrijevo posodo na sterilno delovno površino. Če se na pokrovu pojavijo kapljice vode, pred vlago na pokrito površino rahlo stresite to vlago, vendar se ne dotikajte notranjosti pokrova.
Ponovite koraka 19 in 20 za vsako petrijevo posodo, tako da eno obrnjeno posodo postavite na stran prejšnje posode, namesto na vato s papirnato brisačo. Posode bodo videti kot položen komplet, na eni strani z vrzeli, da lahko odvečna vlaga izhlapi.
Poglejte obrnjene petrijeve posode in preverite, ali vlaga na straneh plošč izhlapi. Ko se vsa vlaga očisti, plošče obrnite desno stran navzgor in takoj pokrijte s pokrovi.
Hranilni agar na površino napišite z brisanjem brisa, ki vsebuje želeno kulturo, na površini hranilnega agarja, preden ga pokrijete s pokrovom. Petrijevo posodo obrnite tako, da je trdnina na vrhu. Nacepljeno petrijevo posodo hranite s trdnim materialom na vrhu in pokrovom na dnu, da ujamete morebitno vlago, ohlapne delce ali rast.