Vsebina
- HPLC in podobne tehnike
- Hitrost, učinkovitost in natančnost
- Stroški in zapletenost
- Občutljivost in ločljivost
HPLC ponuja hitro, avtomatizirano in zelo natančno metodo za prepoznavanje nekaterih kemičnih sestavin v vzorcu, vendar je lahko drago, zapleteno in ne deluje za vse vzorce. Medicinski, forenzični, okoljski in proizvodni laboratoriji uporabljajo tehniko za količinsko določitev in ločitev kemikalij v vzorcu. HPLC ima tako prednosti kot slabosti v primerjavi z drugimi tehnikami.
HPLC in podobne tehnike
Tako kot druge oblike kromatografije tudi HPLC omogoča ločevanje kemičnih sestavin z uporabo mobilne in stacionarne faze. Mobilna faza je tekoča, stacionarna faza pa trdna. Ker se različni sestavni deli premikajo z različnimi hitrostmi, se ločijo drug od drugega. Nadomestne tehnike vključujejo kapilarno elektroforezo, pri kateri snovi migrirajo skozi raztopine v električnem polju in druge kromatografske metode, kot so ekstrakcija trdne faze, plinska kromatografija in tankoslojna kromatografija.
Hitrost, učinkovitost in natančnost
V primerjavi z drugimi kromatografskimi tehnikami, kot je TLC, je HPLC izjemno hiter in učinkovit. Uporablja črpalko, ne pa gravitacijo, da sili tekoče topilo skozi trdi adsorbentni material, pri čemer se različne kemične komponente ločijo, ko se gibljejo z različnimi hitrostmi. Postopek je mogoče zaključiti v približno 10 do 30 minutah in prinaša visoko ločljivost. Je natančen in zelo ponovljiv. Ker je večinoma avtomatiziran, lahko osnovne tekme HPLC izvajamo z minimalnim treningom.
Stroški in zapletenost
Kljub svojim prednostim je HPLC lahko drag, saj zahteva velike količine drage organske snovi. Tehnike, kot sta ekstrakcija v trdni fazi in kapilarna elektroforeza, so lahko cenejše in še hitrejše, zlasti za analizo v dobri proizvodni praksi. Čeprav je z obstoječimi HPLC metodami razmeroma enostavno uporabljati, je lahko odpravljanje težav ali razvoj novih metod zapleteno. To je v veliki meri posledica množice različnih modulov, stolpcev in mobilnih faz.
Občutljivost in ločljivost
Na splošno je HPLC vsestranski in izredno natančen, ko gre za identifikacijo in količinsko določitev kemijskih sestavin. V številnih korakih je natančnost HPLC v veliki meri odvisna od tega, da je postopek avtomatiziran in zato zelo ponovljiv. HPLC ima za nekatere spojine nizko občutljivost, zato je nekatere ne moremo zaznati, ker so nepovratno adsorbirane. Hlapne snovi se bolje ločijo s plinsko kromatografijo.