Vsebina
- Kaj je BSA?
- Kaj je 1% raztopina?
- Natančno tehtanje majhnih količin praška
- Izbira pravega topila za raztapljanje praška BSA
Tako kot upoštevanje receptov za kuhanje okusnih jedi, tudi za uspešno izvajanje poskusov je treba posvetiti pozornost mešanju kemikalij na prave načine. Pri ponovitvi poskusa in doseganju enakih rezultatov je pomembno določiti rešitve za določen odstotek, na primer 1%.
Kaj je BSA?
Beseda goved pomeni "krava", goveji serumski albumin (BSA) pa je protein, ki prihaja od krav. Zlasti BSA je vrsta beljakovin, imenovanih albumin, ki jih v velikih količinah najdemo v krvi krav. Kri je mešanica rdečih krvnih celic, zato je kri videti rdeče, in veliko različnih vrst beljakovin, ki se raztopijo v vodi. Če bi odvzeli celice v krvi, bi vam pustili bistro tekočino, imenovano serum. Tako je BSA albuminski protein, ki ga najdemo v krvi krav. V krvi je naloga albumina, da prenaša druge proteine od kraja do kraja.
Kaj je 1% raztopina?
Beseda "rešitev" opisuje nekaj, kar obstaja kot tekočina. Na primer, voda in mleko sta raztopini. Ko rečemo, da je raztopina vode 1% sladkorja, to pomeni, da je 1% molekul v tej raztopini molekule sladkorja, ostalih 99% pa molekule vode. Tako 1% raztopina BSA pomeni, da je 1% molekul v tej raztopini BSA. Ker se BSA pogosto prodaja kot suh prah, je treba določeno količino tehtati in nato raztopiti v tekočini, kot je voda. Raztapljanje praška BSA v tekočino se imenuje razredčevanje po teži po prostornini, ki je v navodilih, ki spremljajo kemikalije ali znanstvene poskuse, pogosto napisano kot "w / v"
Natančno tehtanje majhnih količin praška
BSA prah je zelo lahek in se pogosto uporablja v majhnih količinah, zato raziskovalci potrebujejo zelo občutljivo tehtalno lestvico, da lahko natančno izmerijo BSA. Raziskovalci pogosto ne potrebujejo velikih količin raztopine BSA, zato bi bilo ustvarjanje več litrov ali litrov naenkrat izguba prahu in prostora za shranjevanje. V poskusih biokemije in molekularne biologije se pogosto uporabljajo majhne količine raztopine BSA, na splošno pa je dobra praksa, da jo vsakič osvežimo. Preprost način priprave 1% raztopine BSA je odtehtati en gram praška BSA, ga naliti v diplomiran valj, v katerem je več kot 100 mililitrov (ml) vode, nato pa dodajte vodo, dokler raven tekočine ne doseže 100 ml oznaka. Matematično je ena, deljena s 100, enaka 1%.
Izbira pravega topila za raztapljanje praška BSA
Vsi poskusi ne zahtevajo raztapljanja BSA v vodi, saj ima čista voda drugačne lastnosti kot tekočina, ki teče v krvnem toku živali in ki obdaja zunaj celic. Tekočina v živalih ima določene količine soli in kislin, zato če je namen raztopine BSA nositi zdravilo, ki ga bomo injicirali živim živalim, je treba prašek BSA raztopiti v posebni tekočini. Običajna tekočina, ki se uporablja za eksperimentalne namene, je fosfatna puferna raztopina (PBS). PBS ima lastnosti, podobne lastnosti tekočine v živih organizmih, kot so miši, psi in ljudje, zato se lahko uporablja za raztapljanje BSA in ne glede na to, kakšna kemična BSA se vrti okoli.