Vsebina
- Antibiotiki in kako delujejo
- Preizkušanje odpornosti proti antibiotikom
- Kirby-Bauerjev test
- Kako izmeriti cono inhibicije
Bakterije so nekateri najbolj obilnih organizmov na Zemlji. Znanstveniki ocenjujejo, da jih je več en bilijon različnih vrst bakterij, ki znašajo več kot pet milijonov trilijonov bilijonov (da, to sta dva ločena trilijona) posamezniki na planetu.
Od vseh teh bakterij, manj kot 1 odstotek povzročajo bolezni pri ljudeh. Te bolezni lahko segajo od želodčne motnje, kot lahko pride do blage okužbe, do resnih in usodnih bolezni, kot je kužna kuga (ki jo povzroči Yersinia pestis bakterije), ki so v 14. stoletju ubile 50 milijonov ljudi.
Zato je odkritje antibiotikov, ki so zdravila, ki odpravljajo bakterije, rešilo toliko življenj. Težava z bakterijami je, da se prilagodijo in razvijejo zelo hitro, kar vodi v to, da so sevi bakterij, odporni na antibiotike, vedno pogostejši. Merjenje cona inhibicije za sev bakterij lahko znanstvenikom in zdravnikom pove, ali je odporen na antibiotik.
Antibiotiki in kako delujejo
Antibiotiki so zdravila, ki ubijajo bakterije. Delujejo tako, da ciljajo in povzročijo smrt bakterijskih celic, medtem ko vaše človeške celice pustijo pri miru. Vsak antibiotik deluje na nekoliko drugačen način, saj cilja na bakterijske strukture in signalizira, da jih odstrani.
Na primer, penicilin (eden najbolj znanih antibiotikov) moti bakterijske celične stene, zaradi česar ne delujejo pravilno in s tem umirajo. Tako imenujemo zdravila, ki delujejo tako betalaktamski antibiotiki.
Makrolidni antibiotiki ciljni bakterijski ribosomi. To preprečuje bakterijam sintetiziranje beljakovin, kar pomeni, da bakterije ne morejo preživeti. Pogost primer je eritromicin, antibiotik, ki se uporablja za zdravljenje različnih okužb, vključno z bronhitisom in številnimi kožnimi okužbami.
Kinolonski antibiotiki so še ena pogosta vrsta antibiotikov, ki delujejo z vmešavanjem bakterijske DNK.
Preizkušanje odpornosti proti antibiotikom
Po prvotnem odkritju antibiotikov v dvajsetih letih prejšnjega stoletja so znanstveniki hitro ugotovili, da se bakterije razvijajo, da bi bile odporne na zdravila. Mnogi znanstveniki so nato poskušali ustvariti metode, ki bi jim omogočile preizkus, kako občutljivi so bakterijski sevi na antibiotike, da bi razumeli, s čim se ukvarjajo.
Začetni testi so vključevali serijska redčenja bakterijske juhe, ki so se razširile na plošče z različnimi koncentracijami antibiotika za določitev občutljivosti. Vendar je ta metoda trajala dolgo časa.
Kirby-Bauerjev test
Tu je tisto Kirby-Bauerjev test Ta metoda sta standardizirala mikrobiologa W. M. M. Kirby in A. W. Bauer. Njihov test vzame čisto bakterijsko kulturo in ga prelije na agar ploščo. Nato se na ploščico agarja položi majhen disk, napolnjen z antibiotiki (primerno imenovan disk z antibiotiki). Okoli plošče se namestijo različni diski z različnimi antibiotiki, bakterije pa se pustijo inkubirati za določen čas.
Ko je disk nameščen na ploščo, bodo antibiotiki začeli difundirati. Če je bakterija, ki jo preučujemo, občutljiva na antibiotik, potem nobena bakterija ne bo rasla blizu diska, ker jo bo zdravilo ubilo.
Ko pa se boste oddaljili dlje od diska z antibiotiki, se bo koncentracija antibiotika zmanjšala. Na določeni razdalji od diska začnete spet opaziti rast bakterij, ker je koncentracija antibiotikov prenizka, da bi vplivala na bakterije.
Območje okoli antibiotičnega diska, ki nima bakterijske rasti, je znano kot cona inhibicije. Območje inhibicije je enakomerno krožno območje brez bakterijske rasti okoli diska z antibiotiki. Večja kot je ta cona, bolj so občutljive bakterije na ta antibiotik. Manjša kot je cona, bolj odporne (in s tem manj občutljive) so bakterije.
Kako izmeriti cono inhibicije
Poleg tega, da sta to prakso in protokol poimenovala, sta znanstvenika Kirby in Bauer ustvarila tudi standardizirane karte, ki so s premerom območja inhibicije določile občutljivost ali odpornost bakterij na bakterije.
Te karte lahko najdete tukaj in z bakterijskimi vrstami, vrsto uporabljenega antibiotika in območjem inhibicijskega premera ugotovite, ali so bakterije odporne, vmesno občutljive ali dovzetne za ta antibiotik.
Opomba: Vedno merite območje inhibicije v milimetrih.
Za merjenje območja inhibicije ploščo najprej postavite na ne odsevno površino. Vzemite ravnilo ali čeljust, ki meri v milimetrih, in postavite "0" na sredino diska z antibiotiki. Izmerite od središča diska do roba območja z ničelno rastjo. Merite v milimetrih.
Ta ukrep meri polmer območja inhibicije. Pomnožite to z dvema, da dobite premer.
Prav tako lahko merite neposredno čez območje inhibicije od roba do roba, ki prehaja skozi središče diska z antibiotiki, da neposredno izmerite premer namesto merjenja polmera.