Vsebina
Biokemija proučuje molekule, kot so DNK, RNA in proteini. Tehnike pikanja so tisto, kar znanstveniki uporabljajo za ločevanje teh vrst molekul. V celicah obstajajo kot mešanica. Zastirka omogoča raziskovalcem, da med mnogimi najdejo en protein, kot iglo v senenem nahodu. Izpiranje piškotkov na splošno poteka tako, da se mešanica DNK, RNA ali beljakovin pretaka skozi ploščico gela. Ta gel omogoča, da se majhne molekule premikajo hitreje kot večje. Nato ločene molekule pritisnemo na membrano, ki pomaga premikati molekule iz gela na membrano. Molekule se prilepijo na membrano, vendar ostanejo na isti lokaciji, ločene drug od drugega, kot da bi bile še v gelu.
Western Blot
Western blot je pogosta tehnika ločevanja beljakovin po velikosti, vendar v ravnih stolpcih. Ti vzporedni stolpci omogočajo raziskovalcem, da primerjajo količino beljakovin v različnih vzorcih, ki se nahajajo tik ob drugem, kot so kegljišča. Če bi na primer preizkušali učinek različnih količin zdravila na rast celic, bi štiri različne skupine celic zdravili z različno količino zdravila. Nato lahko celice razbijete in beljakovine vsake skupine sprostite v ločenih stezah na gelu. Širjenje beljakovin na ta način vam omogoča, da vidite, kaj povečuje koncentracija zdravil na določen protein.
Severni blot
Za zaznavanje RNA se uporablja severno pikanje. Celice se lahko razbijejo in sprostijo svojo RNA. RNA iz različnih vrst celic se lahko izvaja na ločenih poteh gela. Gel širi različne RNA po velikosti. Te čiste, vzporedne vrstice RNA omogočajo raziskovalcu, da primerja, katere vrste celic ima, koliko katere RNA. Ta metoda omogoča raziskovalcu, da ugotovi, ali imajo celice določene bolezni več te RNA ali manj te RNA. Northern blotting lahko razkrije, kako bolezen deluje na ravni proizvodnje RNA.
Južni blot
Southern blotting je izvirna tehnika pikanja, ki je začela s sistemom poimenovanja. Izumil ga je Edwin Southern. Southern blot se uporablja za zaznavanje količine DNK v mešanici. Tako kot pri beljakovinah in RNA se lahko tudi DNA celice sprosti, ko se ta celica odpre. Južno pikanje loči DNK od različnih vrst celic po velikosti. DNK iz vsakega vzorca se razširi na čiste, vzporedne poti. Posamezne koščke DNK je mogoče zaznati z radioaktivno ali fluorescentno sondo, ki je zasnovana tako, da se veže samo na tisti del DNK. Energijski signal radioaktivne sonde ali utripi svetlobe iz fluorescenčnega signala povedo raziskovalcem, koliko tega kosa DNK je v vsakem vzorcu.
Druge pike
Tri glavne tehnike pikanja - zahodna, severna in južna - so bile spremenjene na različne načine, da bi odkrili nekoliko različne molekule. Na primer Western blot proti Južnemu. zaznava beljakovine in DNK. Vsaka spremenjena tehnika se običajno izvaja na običajen način, uporablja pa drugačen način za zaznavanje molekule, ki se širi v vzporedne pasove. Na jugozahodnem blotu odkrijejo molekule beljakovin, nataknjene na DNK. Severozahodni bloti zaznajo molekule beljakovin, nataknjene na RNA. Farwestern blots zaznajo molekule beljakovin, ki so se prilepile na druge beljakovine.