Vsebina
V bioloških reakcijah encimi delujejo podobno kot katalizatorji, ki zagotavljajo alternativne poti za nastanek reakcij in pospešujejo celoten postopek. Encim deluje znotraj substrata, njegova sposobnost povečanja hitrosti reakcije pa je odvisna od tega, kako dobro se veže s substratom. Michaelisova stalnica, ki jo označuje KM, je merilo afinitete encima / substrata. Manjša vrednost kaže na tesnejšo vezavo, kar pomeni, da bo reakcija dosegla največjo hitrost pri nižji koncentraciji. KM ima enake enote kot koncentracija substrata in je enaka koncentraciji substrata, kadar je hitrost reakcije polovica njegove največje vrednosti.
Zaplet Michaelis-Menten
Hitrost encimske reakcije je odvisna od koncentracije substrata. Za izdelavo načrta za določeno reakcijo raziskovalci pripravijo več vzorcev substrata v različnih koncentracijah in zabeležijo hitrost nastajanja izdelka za vsak vzorec. Načrt hitrosti (V) proti koncentraciji () ustvarja krivuljo, ki se hitro vzpenja in se izravna z največjo hitrostjo, kar je točka, v kateri encim deluje čim hitreje. Temu rečemo saturacijski zaplet ali zaplet Michaelis-Menten.
Enačba, ki določa zaplet Michaelis-Menten, je:
V = (Vmaks ) ÷ (KM +, ta enačba se zmanjša na V = Vmaks ÷ 2, torej KM je enaka koncentraciji substrata, kadar je hitrost polovica njegove največje vrednosti. To omogoča teoretično branje KM izven grafa. Čeprav je mogoče prebrati KM z zapleta Michaelis-Menten, ni enostavno ali nujno natančno. Druga možnost je, da oblikujete vzajemno enačbo Michaelisa-Mentena, ki je (po tem, ko so vsi pojmi preurejeni): 1 / V = {KM/ (Vmaks ×)} + (1 / V)maks) Ta enačba ima obliko y = mx + b, kjer To je enačba, ki jo biokemiki običajno uporabljajo za določitev KM. Pripravljajo različne koncentracije substrata (ker je ravna črta, tehnično potrebujejo le dve), oblikujejo rezultate in preberejo KM neposredno iz grafa.Parcela Lineweaver-Burk