Encim je protein, ki katalizira (poveča hitrost) kemičnih reakcij. Optimalna temperatura večine encimov oziroma temperatura, pri kateri encimi najbolje olajšajo reakcijo, je med 35 in 40 stopinj Celzija. Zvišanje temperature znotraj tega okna poveča hitrost reakcije, ker vzbudi molekule in poveča hitrost, ko encimi / reaktanti trčijo in reagirajo, da nastane produkt. Vendar pa previsoka temperatura lahko encim denaturira in prepreči njegovo delovanje.
Določite optimalno temperaturo encima, tako da reakcijo segrejete z infinitesmalnimi količinami in odvzamete majhne vzorce reakcije, da ugotovite, kdaj pride do največje hitrosti nastajanja izdelka.
Izberite metodo. Ugotovite, kako boste merili koncentracijo izdelka v različnih točkah eksperimenta. Na primer, lahko merite koncentracijo mnogih izdelkov s spektrofotometrom in izračunate koncentracijo iz absorbance ali z merjenjem fluorescence in izračunavanjem koncentracije iz fluorescence.
Nastavite poskus. Postavite svoje reaktante in encime v majhno posodo s pokrovom, kot je scintilacijska viala. Reakcija se bo začela. Vialo za scintilacijo postavite v večjo čašo vode sobne temperature. Čašo postavite na grelno ploščo. V čašo postavite termometer. To vam omogoča merjenje temperature reakcije na različnih točkah.
Vzemite 100 mikrolitrski vzorec reakcije pri sobni temperaturi, približno 25 stopinj Celzija. Vklopite grelno ploščo. Pri različnih temperaturah med 30 in 40 stopinj Celzija (30,5, 31, 31,5 itd.) Vzemite 100 mikrolitrskih vzorcev vaše reakcije.
Določite koncentracijo izdelka pri vsaki temperaturi. Ko se temperatura dvigne nad 40 stopinj Celzija, boste opazili zmanjšanje hitrosti, s katero se substrat pretvori v izdelek, ker je encim denaturiran. Točka, v kateri se izdelek proizvaja z največjo hitrostjo, je točka, pri kateri je temperatura optimalna.